HEMOGLOBINA.

HEMOGLOBINA.

PRINCIPIO DEL METODO 

La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a 

metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en 

cianmetahemoglobina. 

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de 

hemoglobina presente en la muestra ensayada1,2. 

SIGNIFICADO CLINICO 

La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color 

rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada 

del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones a los 

tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los 

niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes 

causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o 

hemorragias. 

Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías, 

deshidratación o estancia en lugares de gran altitud1,5,6. 

El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los 

datos clínicos y de laboratorio. 

REACTIVOS 

HEMOGLOBIN 

50x 

Ferricianuro de potasio 

Cianuro de potasio 

Dihidrogeno fosfato de potasio 

0,60 mmol/L

77 mmol/L

2 mmol/L

 Patrón de Hemoglobina 15 g/dL 

Origen animal 

PRECAUCIONES 

Cianuro de potasio: Nocivo (Xn): R26/27/28: Muy tóxico por 

inhalación, por ingestión y en contacto con la piel. R32: En contacto 

con ácidos libera gases muy tóxicos. 

Peligroso para le medio ambiente (N): R52/53: Nocivo para los 

organismos acuáticos, puede provocar a largo plazo efectos 

negativos en el medio ambiente acuático. 

S7: Manténgase el recipiente bien cerrado. S28: En contacto con la 

piel, lavar inmediatamente y abundantemente con agua. S45: En 

caso de accidente o malestar, acudir inmediatamente al medico. S60: 

Elimínese el producto y su recipiente como residuos peligrosos. S61: 

Evítese su liberación al medio ambiente. Recábense instrucciones 

específicas/ las fichas de datos de seguridad. 

Cianuro (venenoso): La concentración de cianuro en el Reactivo 

concentrado (50x) es sensiblemente menor que la dosis mínima letal 

para el adulto. Su acidificación puede provocar liberación de ácido 

cianhídrico. 

PREPARACION 

Reactivo de trabajo (RT): 

- Para 5 mL 4,9 mL agua destilada + 2 gotas de Reactivo 

- Para 250 mL 245 mL agua destilada + 1 frasco (5 mL) de Reactivo 

Mezclar bien. 

Estabilidad: 2 meses en nevera a 2-8ºC, protegido de la luz. 

CONSERVACION Y ESTABILIDAD 

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de 

caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los 

viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita la 

contaminación durante su uso. 

No usar reactivos fuera de la fecha indicada. 

Indicadores de deterioro de los reactivos: 

- Presencia de partículas y turbidez. 

- Absorbancia (A) del Blanco a 540 nm ≥ 0,01. 

MATERIAL ADICIONAL 

- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 540 nm. 

- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 

- Equipamiento habitual de laboratorio. 

MUESTRAS 

Sangre capilar o venosa1

. 

Usar anticoagulantes como EDTA, heparina u oxalato

PROCEDIMIENTO 

1. Condiciones del ensayo: 

Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 540 nm 

Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz 

Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . .. . . 15-25ºC 

2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada. 

3. Pipetear: 

 Blanco Patrón Muestra 

RT (mL) 5,0 5,0 5,0 

HEMOGLOBIN CAL (μL) -- 20 -- 

Muestra (μL) -- -- 20 

4. Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (15-25ºC). 

5. Leer la absorbancia (A) del calibrador y la muestra, frente al Blanco 

de reactivo. 

CALCULOS 

- Con factor2

: 

(A) Muestra x 36,77 = g/dL de hemoglobina en la muestra 

- Con Patrón: 

Patrón)A(

Muestra)A( x 15 (Conc. Patrón) = g/dL de hemoglobina en la muestra 

CONTROL DE CALIDAD 

Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer 

correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias. HEMOGLOBIN CAL 

VALORES DE REFERENCIA1 

 Hombres 14 - 18 g/dL ≅ 8,7 - 11,2 mmol/L 

 Mujeres 12 - 16 g/dL ≅ 7,5 - 9,9 mmol/L 

Estos valores son orientativos.

RESULTADOS:

(A)MUESTRA / (A)PATRON X 15= gr/dL       ST=.340

.392/.340X15= 17.29gr/dL HOMBRE.

.304/.340X15= 13.41gr/dL MUJER.